Практикум по промышленной микробиологии Владимир 2015

Протеолитическая активность

жүктеу 0,55 Mb.

бет	33/42
Дата	05.12.2022
өлшемі	0,55 Mb.
	#40475
түрі	Практикум

1 ... 29 30 31 32 33 34 35 36 ... 42

Book

Протеолитическая активность определяется наличием ферментов (протеазы), катализирующих расщепление белков на поли- и олигопепти-ды. Протеазы выделяются различными видами бацилл, актиномицетов, мицелиальных грибов и другими микроорганизмами. Активность внекле-точных протеаз определяют, используя в качестве субстрата желатину, ка-зеин или другие белки.

Определение чувствительности микроорганизмов к антибиоти-ческим веществам. Чувствительность микроорганизмов к антибиотикам удобно определять с помощью выпускаемых промышленностью бумаж-ных дисков, пропитанных определенными антибиотиками. Концентрация антибиотиков в дисках подобрана с таким расчетом, чтобы диаметры за-держки роста стандартных тест-организмов были 28-32 мм. Если иссле-дуемые микроорганизмы чувствительны к данным антибиотикам, то во-круг дисков образуются зоны отсутствия роста. Диаметр зоны измеряют миллиметровой линейкой. Зона более 30 мм свидетельствует о высокой чувствительности микроорганизма к антибиотику, а менее 12 мм - о сла-бой чувствительности.

Лабораторная работа № 21 Определение

биохимических свойств Bacillus subtilis
Цель работы. Освоить методики проведения биохимических тестов для определения ферментативных свойств и идентификации бактерий.

Материалы и оборудование. Чистая культура Bacillus subtilis в чашках Петри с МПА, бактериологические петли, спиртовки, стерильные пробирки, предметные стекла, перекись водорода, среды с моно-, ди-, по-лисахаридами и спиртами, содержащие индикаторы; пробирки с МПБ; пробирки с 2 - 3%-ной пептонной водой; растворы цистина и цистеина, лакмусовая бумага, пробирки с мясо-пептонной желатиной, системы инди-каторные бумажные (СИБ) для идентификации энтеробактерий, производ-ства Нижегородского предприятия бактерийных препаратов; стерильный физиологический раствор, термостат с температурой 37 0С.

Ход выполнения работы

Ознакомьтесь с инструкцией, прилагаемой к системе индикатор ной бумажной (СИБ), для идентификации энтеробактерий и выберите с помощью преподавателя необходимый Вам набор тестов из этой системы.

Разлейте стерильный физиологический раствор в стерильные пробирки по 0,3 мл (по две пробирки на один тест: одна контрольная, ин кубируется без бактерий, а вторая - опытная), внесите в ряд опытных про бирок одинаковое количество (одна петля агаровой культуры или 0,1 мл бульонной культуры) исследуемой культуры бактерий.

В соответствии с инструкцией внесите в пробирки бумажные

диски тестов и инкубируйте пробирки при температуре 37 0С в соответст вии с инструкцией.

Засейте чистую культуру исследуемых бактерий бактериологиче ской петлей на среды с моно-, ди-, полисахаридами и спиртами, предос тавленные преподавателем, и инкубируйте их в течение 18 -24 ч при тем пературе 37 °С.

Для определения каталазной активности на предметное стекло нанесите каплю 3%-ного раствора перекиси водорода, внесите в нее петлю исследуемой агаровой или бульонной культуры бактерий и тщательно пе ремешайте. При положительной реакции (наличии каталазы) перекись во дорода будет разлагаться с образованием воды и выделением кислорода в виде пузырьков.

Через 24 ч внимательно просмотрите все контрольные и опытные пробирки с тестами СИБ и посевы на среды с сахарами и спиртами. Ре-зультаты определения ферментативных свойств Bacillus subtilis оформите в виде табл.6

							Таблица 6
	Ферментативные свойства Bacillus subtilis

Сахаролитические свойства				Протеолитические			Наличие
				свойства			катал азы
Глюкоза	Лактоза	Маннит	Сорбит	Индол	H₂S	NH₃

Лабораторная работа № 22

жүктеу 0,55 Mb.

Достарыңызбен бөлісу:

1 ... 29 30 31 32 33 34 35 36 ... 42