Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам

1. 
   Смойте стерильным физраствором агаровую культуру. Для этого
   

• 
  пробирку или чашку Петри стерильно внесите 2 - 3 мл физраствора. Бак териологической петлей осторожно снимите культуру с поверхности агара и тщательно размешайте в физрастворе.
  

2. 
   Из полученной взвеси клеток приготовьте бактериальную суспен зию с концентрацией 500 млн микробных клеток по стандарту мутности и внесите в чашку Петри с подсушенным стерильным МПА. Равномерно распределите суспензию на поверхности агара и оставьте при комнатной температуре на 30 мин для адсорбции клеток.
   

2. 
   Через 30 мин стерильной пипеткой отберите излишек суспензии и поместите на поверхность засеянной бактериями среды на равном расстоя-
   

нии (2,5 - 3,0 см) друг от друга и на расстоянии 1,5 - 2,0 см от края чашки бумажные диски, пропитанные антибиотиками.

4. 
   Инкубируйте посевы при температуре 37 0С в течение 24 ч.
   

4. 
   Через 24 ч измерьте диаметр зоны задержки роста культуры во круг каждого диска с антибиотиком и определите степень чувствительно сти культуры по следующим критериям:
   

а) диаметр зоны задержки роста более 25 мм - культура высокочув ствительная,

б) от 15 до 25 - чувствительная;

в) от 10 до 14 - малочувствительная;

г) менее 10 мм и полное отсутствие - устойчивая.

4. 
   Результаты оформите в виде табл. 7.
   

Таблица 7

1. 
   Культуральные свойства. Рост на плотных питательных средах.
   

2. 
   Культуральные свойства. Рост в жидких питательных средах.
   

3. 
   Физиолого-биохимические свойства. Отношение к молекулярно му кислороду и рост в анаэробных условиях.
   

4. 
   Физиолого-биохимические свойства. Определение способности к аэробному дыханию.
   

5. 
   Физиолого-биохимические свойства. Реакция на нитраты с дифе ниламином. Крахмал-йодная реакция на нитриты.
   

6. 
   Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотиче ским веществам.
   

Лабораторная работа № 23 Идентификация