микроорганизмов по определителю бактерий Берджи

ные определения ферментативных свойств зашифрованных преподавате-лем культур бактерий, предметные стекла с готовыми препаратами зашиф-рованных культур бактерий, микроскоп, иммерсионное масло.

1. 
   Внимательно промикроскопируйте с иммерсионной системой го товый препарат неизвестной Вам культуры бактерий, охарактеризуйте морфологию клеток бактерий, их размер и окраску по Граму.
   

2. 
   Ознакомьтесь с данными ферментативных свойств идентифици руемой культуры.
   

3. 
   По определителю бактерий Берджи постарайтесь определить се мейство, род и вид данных микроорганизмов.
   

4. 
   Подробно запишите характеристику идентифицируемой культуры бактерий в табл. 8.
   

5. 
   Результаты идентификации запишите в табл. 9.
   

Таблица 9

Номер	Идентификация
культуры	Семейство	Род	Вид
1
2

Лабораторная работа № 24 Качественно-

1. 
   Приготовьте суспензию почвы. Для этого отвесьте 10 г почвы и перенесите навеску в стерильную ступку, добавьте 2 - 3 мл стерильной во ды и разотрите до пастообразного состояния.
   

2. 
   Полученную пробу почвы (10 г) перенесите в стерильную колбу, содержащую 90 мл стерильной воды, размешайте в течение 5 мин и дайте от стояться 30 мин. Это первое разведение исследуемой пробы почвы.
   

3. 
   Приготовьте ряд последующих 10-кратных разведений этой про бы в пробирках в зависимости от предполагаемой численности микроорга низмов в пробе. Для приготовления каждого последующего разведения ис пользуйте новую пипетку.
   

4. 
   Полученные разведения в объеме 0,1 мл посейте (на каждое раз ведение по 2 - 3 чашки):
   

а) на МПА для определения общего числа бактерий;

б) на среду Чапека для учета и выделения актиномицетов; в) на среду Эшби для учета и выделения азотобактера.

5. 
   Равномерно распределите каплю инокулята на поверхности агара, покачивая чашку, и оставьте на 30 мин для адсорбции при комнатной тем пературе.
   

5. 
   Засеянные чашки Петри через 30 минут переверните вверх дном и поместите в термостат при температуре 28 - 37 °С для выращивания мезо-фильной микрофлоры. Количество бактерий на МПА учитывайте через 1 - 5 сут, актиномицетов и азотобактера - через 5 - 7 сут.
   

5. 
   Учитывайте количество колоний следующим образом: дно чашки Петри маркером разделите на равные секторы, учтенные колонии отмечай те точками на стекле. Подсчитайте среднее число колоний на чашке и да лее пересчитайте количество микроорганизмов на 1 г воздушно-сухой поч вы по формуле
   

• 
  = -
  

Результаты работы внесите в табл. 10.

Таблица 10

Лабораторная работа № 25

1. 
   Отберите пробы воды в стерильные флаконы или колбы в объеме 50 или 100 мл непосредственно перед началом занятия: а) пробу водопро водной воды; б) пробу из отрытого водоема (ручей, ключ, пруд). До начала занятия (посева) пробы можно хранить не более 3 ч при температуре не выше 4 °С.
   

2. 
   Приготовьте ряд последующих 10-кратных разведений отобран ных проб в пробирках, в зависимости от предполагаемой численности микроорганизмов в пробе. Для приготовления каждого последующего раз ведения используйте новую пипетку.
   

3. 
   Полученные разведения в объеме 0,1 мл посейте (на каждое раз ведение по 2 - 3 чашки):
   

а) на МПА для определения общего числа бактерий;

б) на среду Эндо для учета БГКП (бактерии группы кишечной па лочки или энтеробактерии).

4. 
   В чашки Петри с МПА и средой Эндо внесите по 0,1 мл послед него и предпоследнего разведений, равномерно распределите каплю ино-кулята на поверхности агара, покачивая чашку, и оставьте на 30 мин для адсорбции при комнатной температуре.
   

5. 
   Засеянные чашки Петри через 30 мин переверните вверх дном и поместите в термостат при температуре 28 - 37 °С для выращивания мезо-фильной микрофлоры. Количество бактерий учитывайте через 1-2 сут.
   

6. 
   Водопроводную воду исследуйте также методом мембранных фильтров, которые простерилизуйте кипячением в течение 30 мин. Фильт ровальную установку «Владисарт» подготовьте к работе вместе с препода вателем.
   

7. 
   Профильтруйте пробу водопроводной воды в объеме 100 мл. Сте рильным пинцетом фильтр аккуратно перенесите в чашку Петри с МПА (для определения общего числа бактерий) и средой Эндо и поместите в термостат с температурой 37 °С.
   

7. 
   Учитывайте количество колоний следующим образом: дно чашки Петри маркером разделите на равные секторы, учтенные колонии отмечай те точками на стекле. Для определения титра подсчитайте среднее число колоний на чашке и умножьте на разведение.
   

7. 
   Для подтверждения принадлежности к БГКП из колоний, вырос ших на среде Эндо, приготовьте фиксированные мазки, окрасьте их по Граму, промикроскопируйте. Грамотрицательные бактерии протестируйте по биохимическим свойствам с системой индикаторной бумажной (СИБ) для идентификации энтеробактерий.
   

10. 
    Подсчитайте количество колоний кишечной палочки на 1 мл воды по формуле (см. с. 47).
    

10. 
    Результаты запишите в табл. 11.
    

Таблица 11