Редуктазаны метил кӛгімен анықтау

Редуктазаны метил кӛгімен стандарттық (ГОСТ 9225-84) және жылдамдық әдісімен анықтауға болады.

 ^С су моншасына - минутқа қойып, кристалдар түгел ерігенше араластырады. Сосын, жылдам С температураға дейін салқындатады, осы ерітіндіден  мл түтікшемен ӛлшем алып, оны  мл тазартылған

суы бар шыны сауытқа құйып, араластырады. Жұмыс ертіндісін мұздатқышта сақтау мерзімі  тәулікке дейін.

Анықтау барысы.  Залалсыздандырылған шыны түтікке  мл метил кӛгінің жұмыс ертіндісін,  мл сүт құйып, резинкалы тығынмен жауып,  рет аударыстырып араластырып температурасы   С редуктазды шыны түтікті кою керек (егер редуктаздық жоқ болса су моншасын қолдануға болады). Су моншасында су деңгейі шыны түтіктегі сүттен жоғары болмауы керек. Шыны түтікті жарықтан сақтау керек.

 Шыны түтікті моншаға қойғанда уақытты белгілеп, оның ішіндегісінің түссізденуін  минут,  сағат және , сағат бақылау керек.

11 сурет – Редуктазалы аппарат:

1- термометрлі су моншасы (а); 2 – су моншасына орнатылған пробиркалар; 3-электрліқыздырғыштың құрылғысы; 4 – жіптері
 Алтыншы кестеге қарап бактериялық тұқымдануы бойынша сүт сапасын және класын бағалап анықтау. Сүт бояуының түссізденгені сынақтың аяқталғаны. Қалған бояудың сақина сияқты жоғарғы қабатында немесе тӛменгі см дейін¸ есепке алынбайды. Шайқағанда сүт бояуының пайда болуы есептелінбейді.
Редуктазаны жылдам әдіспен анықтау.  Шыны түтікке  мл сүт құйып, С температураға дейін жылытып, түтікті редуктаздыққа немесе су моншасына қоямыз.

 Жылыған сүтке  мл метил кӛгі ертіндісін құйып (стандарттық тәсілмен әзірленгендей бірақ,  рет сұйытылған.  мл жұмыс ертіндісіне  мл тазартылған су қосу керек). Бұл ертіндіні сынаққа қояр алдында дайындайды. Шыны түтіктегі затты араластырып  - С температурада су моншасына қою керек (бақылау үшін осындай сынақ сүтін, метил кӛгісіз шыны түтікке кою керек).

 Шыны түтікті моншаға қойғанда уақытты белгілеп, оның ішіндегісінің түссізденуін  минут,  сағат және  сағат бақылау керек.

Редуктазаны резазурин арқылы анықтау. Бұл сынама арқылы сауғаннан 2 сағаттан кейін сүттің (по ГОСТ 9225-84) құрамындағы бактериялардың санын анықтауға негізделген.

Резазурин ерітіндісін дайындау. 100 мг резазуринді 200 мл қайнатылған, 252С дейін суытылған дистелденген сумен ерітеді. Негізгі ерітіндінің күңгірт түсті шыны сауытта сақтау мерзімі 30 тәуліктен кӛп емес 8-10С температурада. Негізгі ерітіндіден жұмысшы ерітіндісін дайындайды. Жұмысшы ерітіндісін дайындау үшін негізгі ерітіндіні қайнатылған, суытылған 252С температурадағы дистилденген сумен 1 : 2,5 қатынаста (10 мл негізігі ерітіндіге 25 мл су қосу) юболуы қажет. Резазуриннің жұмысшы ерітіндісіндегі мӛлшері 0,014%. Жұмысшы ерітіндісінің тоңазытқышта күңгірт шыны сауытта сақтау мерзімі – үш тәуліктен артық емес.

Анықтау тәсілі: 1 Стерилді сынамаға пипеткамен 1 мл резазуриннің жұмысшы ерітіндісін және 10 мл сүт ӛлшеп аламыз.

2. 
   Сынаманы стерилді резеңке тығынмен жауып, 3 рет баяу аударып, ішіндегісін араластырып және су моншасына 37±1ºС температурады қояды. Редуктазниктегі су мӛлшері, сынаманы редуктазникке қойғанда, сынама сұйықтығынан бірнеше рет жоғары болуы керек (сынамаларды тура күн сәулесінен қорғау қажет).
   
3. 
   Анализдің уақыты сынаманы су моншасына қойғаннан кейін басталады. 20 мин және 1 сағаттан кейін, сынаманы сілкілемей және аудармай, түсінің ӛзгересін анықтау қажет.
   
4. 
   Сүттің сапасын және тобын анықтау арқылы 7 кестеде берілген. Пайда болған сүттің түсін сынаманы су моншасынан алғанда және сілкіген кезде саналмайды.
   

Кесте 7 – сүттің құрамындағы бактерия санын анықтау және олардың топтарын ГОСТ 9225-84 бойынша белгілеу

4. 
   
   жүктеу 1,46 Mb.
   
   Достарыңызбен бөлісу: