Учебно-методический комплекс дисциплины «Нуклеиновые кислоты»



жүктеу 7,52 Mb.
бет36/117
Дата28.09.2023
өлшемі7,52 Mb.
#43588
түріУчебно-методический комплекс
1   ...   32   33   34   35   36   37   38   39   ...   117
КОНСПЕКТЫ ЛЕКЦИЙ

Праймосомы
Синтез олигорибонуклеотидного праймера, необходимого для синтеза ДНК, осуществляемого ДНК-полимеразой, катализируют ферменты, обладающие РНК-полимеразной активностью. В клетках E. coli единственным ферментом, осуществляющим инициацию синтеза на опережающей цепи, является праймаза – белок гена dnaG.
Инициация фрагментов Оказаки на отстающей цепи происходит по другому механизму, но осуществляется тоже рибо-праймерами длиной 6–10 нуклеотидов. Структура этих праймеров более разнообразна. Праймазы чаще узнают фрагменты матрицы, имеющие следующую структуру : 3'-C2A2C2-5', 3'-C2AC3-5', 3'-C2A2T2-5'.
Ферменты инициации вместе со вспомогательными белками входят в состав сложных комплексов – праймосом, которые, в свою очередь, являются компонентами реплисом, осуществляющих процесс полной репликации. Праймосома E. coli обладает молекулярной массой около 106 D и включает ~20 полипептидов (табл. 5.2).
Таблица 5.2
Белки, участвующие в репликации



Белок

Мол. масса, D kD

К-во субъединиц

Функция

SSB

18,5

4

Связывание одноцепочечной ДНК

Белок i

22

3

Ансамбль праймосомы

n

14

2

n'

76

1

n''

17

1

dnaC

29

1

dnaB

50

6

Праймаза (dnaG)

60

1

ДНК-полимераза III-холофермент

380

2

ДНК-полимераза I

102

1

Удаление праймеров

Лигаза

74

1

Легирование

Гираза А

135

2

Суперскручивание

Гираза B

50

2

Суперскручивание

Rep-белок

65

1




Хеликаза II

75

1




dnaA-белок

48




Инициатор репликации

Праймосома передвигается по матрице, катализируя синтез праймера. Она использует энергию АТР за счет ферментативной активности белка n', который гидролизует ATP до ADP и PPi. В комплекс праймасомы входит ДНК-праймаза (продукт гена dnaG), белок n, комплекс 6 молекул белка dna B, молекулы dnaC, молекулы n'', i, количество копий которых не установлено. Праймосоме предшествует образование комплекса одноцепочечной ДНК с тетрамером белка SSB (single-stranded DNA binding protein) во множестве копий. Праймосома движется по опережающей цепи в сторону от 3'- конца матрицы. Она входит в состав более сложного комплекса – реплисомы, осуществляющей полный процесс репликации. Обе цепи ДНК реплицируются одновременно. Фрагменты Оказаки также синтезируются в направлении 5'3', и перемещение работающей ДНК-полимеразы вдоль матричной цепи ДНК при синтезе каждого индивидуального фрагмента Оказаки должно быть противоположным тому, которое имеет место в случае синтеза ведущей цепи. По гипотезе Корнберга отстающая цепь развернута на 180º, и реплисома, включающая праймосому, движется в одном направлении, одновременно реплицируя обе цепи. Эту схему называют моделью тромбона.


У эукариот праймирование осуществляется благодаря комплексу ферментов, включающих ДНК-полимеразу α – праймазу. Мультибелковый репликативный комплекс состоит из более 30 белков, включающих также 3'-5' экзонуклеазу, ДНК-лигазу I, РНКазу Н, ДНК-топоизомеразу I, хеликазу. Комплекс включает также белок, связывающий динуклеотид-аденозин-тетрафосфат – Ар4А. (Имеются данные о том, что праймирование может осуществляться с участием Ар4А). Обычно комплекс ДНК-полимераза-α-праймаза состоит из 4 видов субъединиц (180, 70, 54–58, и 46–50 kD), но количественный их состав может быть различным. Синтез РНК-праймеров начинается с АТР или GTP. Вторым нуклеотидом с 5'-конца является только GMP, причем он связывается праймазой в первую очередь. После образования рибопраймера размером 7–10 нуклеотидов ДНК-полимераза  способна наращивать его дезоксирибонуклеотидами.

жүктеу 7,52 Mb.

Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   32   33   34   35   36   37   38   39   ...   117




©g.engime.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет
рсетілетін қызмет
халықаралық қаржы
Астана халықаралық
қызмет регламенті
бекіту туралы
туралы ережені
орталығы туралы
субсидиялау мемлекеттік
кеңес туралы
ніндегі кеңес
орталығын басқару
қаржы орталығын
қаржы орталығы
құрамын бекіту
неркәсіптік кешен
міндетті құпия
болуына ерікті
тексерілу мемлекеттік
медициналық тексерілу
құпия медициналық
ерікті анонимді
Бастауыш тәлім
қатысуға жолдамалар
қызметшілері арасындағы
академиялық демалыс
алушыларға академиялық
білім алушыларға
ұйымдарында білім
туралы хабарландыру
конкурс туралы
мемлекеттік қызметшілері
мемлекеттік әкімшілік
органдардың мемлекеттік
мемлекеттік органдардың
барлық мемлекеттік
арналған барлық
орналасуға арналған
лауазымына орналасуға
әкімшілік лауазымына
инфекцияның болуына
жәрдемдесудің белсенді
шараларына қатысуға
саласындағы дайындаушы
ленген қосылған
шегінде бюджетке
салығы шегінде
есептелген қосылған
ұйымдарға есептелген
дайындаушы ұйымдарға
кешен саласындағы
сомасын субсидиялау