Учебно-методический комплекс дисциплины «Нуклеиновые кислоты»



жүктеу 7,52 Mb.
бет37/117
Дата28.09.2023
өлшемі7,52 Mb.
#43588
түріУчебно-методический комплекс
1   ...   33   34   35   36   37   38   39   40   ...   117
КОНСПЕКТЫ ЛЕКЦИЙ

7.4.2. Элонгация
Этап элонгации включает два различающихся по механизму синтеза лидирующей и отстающей цепей на обеих материнских цепях ДНК. В репликативной вилке локализован и функционирует репликативный комплекс, ведущий и непрерывный синтез ДНК на лидирующей цепи от точки инициации до конца репликона, и прерывистый синтез в виде фрагментов Оказаки на противоположной цепи. Впереди ДНК-синтезирующего комплекса перемещается ДНК-хеликаза, она расплетает цепи родительской ДНК. С образующимися одноцепочечными участками связываются тетрамеры SSB-белка, которые стабилизируют эти участки и облегчают процесс расплетания двойной спирали.
Репликативный комплекс E. coli состоит из 35–40 молекул белков молекулярной массой более 2·106 D, не считая SSB-белка, количество копий которого варьирует в зависимости от длины одноцепочечных участков ДНК. Он включает в себя минимальный (кор)-фермент ДНК-полимеразы III (состоящий из трех полипептидных цепей – α, ε, θ ), подвижный связывающий β-белок (sliding clamp) (41 kD) и белки γ-комплекса (скрепляющие белки, brace proteins). Роль γ-комплекса, состоящего из 5 полипептидов (γ, δ, δ’, χ, ψ), заключается в распознавании РНК-затравок на матричной ДНК. Комплекс связывается с единственным праймером на ведущей цепи ДНК или с каждым из праймеров фрагментов Оказаки на отстающей цепи. Это делает возможным присоединение к праймерам кор-фермента ДНК-полимеразы и двух молекул β-белка. Димер β-белка образует кольцо вокруг молекулы ДНК, оставляя свободным 3'-ОН конец, и стимулирует АТРазную активность γ-комплекса. Связавшись с матрицей-затравкой, β-белки и белки γ-комплекса обеспечивают присоединение к этому комплексу кор-фермента ДНК-полимеразы III. Используя праймер для инициации синтеза ДНК, фермент при наличии четырех dNTP синтезирует цепь ДНК, комплементарную родительской. При синтезе ведущей цепи холофермент ДНК-полимеразы III, состоящий из α, ε, и θ субъединиц кор-фермента, белков γ-комплекса, β- и τ-белка, синтезирует ведущую цепь ДНК длиной 50 000 нуклеотидов со скоростью более 500 нуклеотидов в секунду, ни разу не диссоциируя от матрицы.
Те же белки участвуют и в прерывистом синтезе отстающей цепи ДНК, который многократно инициируется на большом количестве праймеров. ДНК-полимераза начинает элонгацию цепей ДНК, присоединяя первый dNTP к 3'-концевому рибонуклеотиду затравки, синтезированной праймазой, – продукту гена dnaG. Обе цепи ДНК синтезируются координированно, благодаря димеризации ДНК-полимеразного комплекса. Димер образуется благодаря участию τ-белка и катализирует синтез ДНК одновременно на двух цепях. Вместе с каталитической субъединицей ДНК-полимеразы вдоль цепи ДНК перемещаются β-белок и белки γ-комплекса (рис. 5.7).
По окончании синтеза очередного фрагмента Оказаки РНК-затравка удаляется с помощью РНКазы Н, специфически расщепляющей РНК в ДНК–РНК-гибридах, или же благодаря 5'3'- экзонуклеазной активности ДНК-полимеразы I. Одновременно эта же ДНК-полимераза застраивает образующуюся брешь комплементарными дезоксирибонуклеотидами, используя в качестве затравки 3'-конец предыдущего фрагмента Оказаки. Наконец, сшивание разъединенных участков отстающей цепи осуществляется при помощи ДНК-лигаз (см. табл. 5.2, 5.3, рис. 5.8).

Рис. 5.8. Схема основных процессов, протекающих в репликативной вилке



жүктеу 7,52 Mb.

Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   33   34   35   36   37   38   39   40   ...   117




©g.engime.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет
рсетілетін қызмет
халықаралық қаржы
Астана халықаралық
қызмет регламенті
бекіту туралы
туралы ережені
орталығы туралы
субсидиялау мемлекеттік
кеңес туралы
ніндегі кеңес
орталығын басқару
қаржы орталығын
қаржы орталығы
құрамын бекіту
неркәсіптік кешен
міндетті құпия
болуына ерікті
тексерілу мемлекеттік
медициналық тексерілу
құпия медициналық
ерікті анонимді
Бастауыш тәлім
қатысуға жолдамалар
қызметшілері арасындағы
академиялық демалыс
алушыларға академиялық
білім алушыларға
ұйымдарында білім
туралы хабарландыру
конкурс туралы
мемлекеттік қызметшілері
мемлекеттік әкімшілік
органдардың мемлекеттік
мемлекеттік органдардың
барлық мемлекеттік
арналған барлық
орналасуға арналған
лауазымына орналасуға
әкімшілік лауазымына
инфекцияның болуына
жәрдемдесудің белсенді
шараларына қатысуға
саласындағы дайындаушы
ленген қосылған
шегінде бюджетке
салығы шегінде
есептелген қосылған
ұйымдарға есептелген
дайындаушы ұйымдарға
кешен саласындағы
сомасын субсидиялау