Терминация репликации
Терминация движения репликативной вилки в конце репликона требует решения как топологических проблем, так и особых механизмов для репликации концов хромосомы. После окончания репликации каждой группы репликонов происходит образование следующих уровней организации ДНК с перераспределением старых и вновь синтезируемых молекул гистонов.
5.4. Основные этапы репликации ДНК
Процесс репликации очень сложный и многоэтапный. Он осуществляется с участием большого количества ферментов и белковых факторов, необходимых для обеспечения всех элементов биосинтеза ДНК – скорости, точности, законченности и т.д. Процесс репликации ДНК условно разделяют на три основных этапа – инициация, элонгация, терминация.
5.4.1. Инициация репликации
Инициация биосинтеза ДНК – это начало синтеза дочерних нуклеотидных цепей. Эта стадия репликации ДНК очень тонко и точно регулируется, однако детальные механизмы ее до конца не раскрыты и в настоящее время интенсивно исследуются. В инициации участвуют разные ферменты и белки. Репликация начинается с расплетания цепей ДНК специальными ДНК-раскручивающими белками, которые называют хеликазами. К расплетенным цепям ДНК присоединяются SSB-белки (single-strand binding proteins), которые удерживают их от ассоциации. После освобождения достаточного места начинается синтез праймера-затравки, необходимого для работы ДНК-полимеразы.
Структура участков инициации
Каждый репликон начинается с точки инициации репликации – ori. К настоящему времени большинство известных данных свидетельствует о структурных отличиях ori от окружающих участков ДНК.
В хромосоме E. coli содержится единственная область начала репликации (oriC), на которой и происходит инициация репликации. Ее минимальный размер составляет 258 п.о. Последовательности областей начала репликации различных энтеробактерий представлены короткими консервативными участками, которые перемежаются дивергировавшими сегментами ДНК, длины которых, однако, высококонсервативны. Консервативные участки оказались сайтами связывания регуляторных белков, разделенных спейсерными последовательностями. OriC содержит пять консенсусных 9-нуклеотидных сайтов связывания инициатора DnaA, названных DnaA-боксами. У всех энтеробактерий области начала репликации содержат 9–14 сайтов GATC, положение восьми из которых консервативно. Следует также отметить, что для инициации репликации важную роль играет определенное топологическое состояние oriC.
Инициация репликации у эукариот происходит на специфических множественных последовательностях нуклеотидов – репликаторах. Наиболее изучены репликаторы дрожжей S. cerevisiae, так называемые автономно реплицирующие последовательности (ARS). В клетках дрожжей идентифицированы ~400 автономно реплицирующихся последовательностей. У млекопитающих области начала репликации располагаются на расстоянии ~100 т.п.н. друг от друга. В структуре репликаторов эукариот обнаружены участки прикрепления к ядерному матриксу (SAR/MAR), канонические ARS-последовательности дрожжей, пиримидиновые тракты, АТ-богатые участки, последовательности, взаимодействующие с белками репликативного комплекса, и т.п.
Достарыңызбен бөлісу: |