Натуральными называют среды, в состав которых входят продукты животного или растительного происхождения. К таким средам относятся овощные или фруктовые соки, животные ткани, разведенная кровь, моло-ко, воды морей, озер и минеральных источников, отвары или экстракты, полученные из природных субстратов, таких как мясо, почва, навоз, раз-личные части растений, клетки микроорганизмов.
Натуральные среды используются главным образом для поддержа-ния культур микроорганизмов, накопления биомассы и для диагностиче-ских целей. К числу натуральных сред, широко применяемых в лаборатор-ной практике, относятся мясо-пептонный бульон, неохмеленное пивное сусло, дрожжевая и картофельная среды, почвенный экстракт.
Мясо-пептонный бульон (МПБ) представляет собой мясную воду, к которой добавляют 1% пептона и 0.5% NaCl. МПБ - богатая питательная среда, но она почти не содержит углеводов. В случае необходимости их добавляют к МПБ чаще всего в количестве 1 - 2 г на 100 мл. МПБ стери-лизуют при 1 атм.
Синтетические среды - это среды, в которые входят лишь соедине-ния определенного химического состава, взятые в точно указанных коли-чествах. Синтетические среды широко используют при исследовании об-мена веществ, физиологии и биохимии микроорганизмов, для разработки состава синтетических сред, обеспечивающих рост микроорганизмов или усиленный биосинтез какого-либо продукта жизнедеятельности. Синтети-ческие среды могут иметь относительно большой набор компонентов, но могут быть и довольно простыми по составу.
Наряду с натуральными и синтетическими средами выделяют так на-зываемые полусинтетические среды. Главными компонентами полу син-тетических сред являются соединения известного химического состава - углеводы, соли аммония или нитраты, фосфаты и т.д. Однако в их состав всегда включаются вещества неопределенного состава, такие как дрожже-вой автолизат, почвенный экстракт или гидролизат казеина. Эти среды на-ходят широкое применение в промышленной микробиологии для получе-ния аминокислот, витаминов, антибиотиков и других важных продуктов жизнедеятельности микроорганизмов.
Дифференциально-диагностические (индикаторные) среды
Эти среды дают возможность быстро отличить одни виды бактерий от других или выявить некоторые их особенности. Примером индикатор-ной среды для выявления бактерий из группы кишечной палочки в естест-венных субстратах может служить агаризованная среда Эндо, в состав ко-торой включен 10%-ный спиртовый раствор основного фуксина. Бактерии рода Escherichia на этой среде образуют малиновые колонии с металличе-ским блеском.
Дифференциально-диагностические среды особенно широко приме-няются в санитарной и медицинской микробиологии для быстрой иденти-фикации определенных групп микроорганизмов.
По физическому состоянию различают жидкие, сыпучие и плотные среды. Жидкие среды широко применяются для накопления биомассы или продуктов обмена, исследования физиологии и биохимии микроорганиз-мов, а также поддержания и сохранения в коллекции культур микроорга-низмов. Сыпучие среды применяют главным образом в промышленной микробиологии для культивирования некоторых продуцентов физиологи-чески активных соединений, а также в коллекциях для сохранения культур микроорганизмов. К таким средам относятся, например, разваренное пше-но, отруби. Плотные среды используют для выделения чистых культур, в диагностических целях для описания колоний, определения количества микроорганизмов, их антибиотической активности, для хранения культур в коллекциях и в ряде других случаев. С целью уплотнения сред применяют желатину или агар.
Агар используют для уплотнения особенно часто. Он представляет собой сложный полисахарид, в состав которого входят агароза и агаропек-тин. Агар получают из некоторых морских водорослей и выпускают в виде пластин, стебельков или порошка. Агар удобен тем, что большинство мик-роорганизмов не используют его в качестве субстрата для роста. В воде он образует гель, который плавится примерно при 100 °С и затвердевает при
0С. Поэтому на агаризованных средах можно культивировать значи-тельную часть известных микроорганизмов. Чаще всего агар добавляют к средам в количестве 1,5 %. Если необходимо получить более влажную сре-ду, вносят 1,0 %, а более плотную и сухую - 2 - 3 % агара.
Условия культивирования микроорганизмов
Для роста микроорганизмов существенное значение имеют не только состав питательной среды, но и такие факторы, как кислотность среды, аэрация, температура, свет, влажность. Развитие микроорганизмов воз-можно лишь в определенных пределах каждого фактора, причем для раз-личных групп микроорганизмов эти пределы часто не одинаковы.
Активная кислотность среды (рН) имеет решающее значение для роста многих микроорганизмов. Большинство бактерий лучше всего растет при рН, близком к 7,0, напротив, микроскопические грибы предпочитают слабокислые среды. Поэтому в приготовленных средах всегда следует оп-ределить значение рН. Значение рН сред может измениться в процессе стерилизации, поэтому после стерилизации его следует проверить и дове-сти до нужного, если это требуется, стерильными растворами кислоты или щелочи.
процессе культивирования микроорганизмов кислотность пита-тельной среды часто меняется. Эти изменения могут быть результатом об-разования продуктов метаболизма или неравномерного потребления от-дельных компонентов среды. Поддержание определенного значения рН во время роста особенно важно для тех микроорганизмов, которые образуют
процессе жизнедеятельности кислоты, но не обладают устойчивостью к ним. К их числу относятся мол очно-кислые бактерии, а также многие псев-домонады.
Достарыңызбен бөлісу: |
