Микробиологическая лаборатория и правила работы в ней
учебных заведениях не разрешается работать с живыми патоген-ными микроорганизмами. Необходимо помнить, что при посеве сапрофит-ных микроорганизмов из окружающей среды случайно может быть внесе-на и патогенная микрофлора. Кроме того, работа с сапрофитными бакте-риями в ряде случаев требует абсолютной стерильности для получения на-дежных результатов опыта. В микробиологической практике используют главным образом чистые культуры микроорганизмов. Культуру, содержа-щую микроорганизмы одного вида, называют чистой. Если в культуре со-держится более одного вида микроорганизмов, она носит название сме-
шанной.
Микробиологическая лаборатория включает ряд помещений, где проводят работу с микроорганизмами или подготовку к ней. Поверхность столов и пол всех лабораторных помещений покрывают легко моющимся материалом. В основном рабочем помещении находятся аппаратура, посу-да и реактивы. Столы имеют подводку электроэнергии и снабжены газо-выми горелками. Кроме основного рабочего помещения лаборатория имеет стерилизационную, где размещены автоклавы и сушильные шкафы, бокс, моечную, холодильную комнату, термостаты или термостатированные комнаты для выращивания микроорганизмов, помещение для хранения культур и т.д.
Подготовка микробиологической лаборатории к работе
Для того чтобы снизить количество микроорганизмов в воздухе и на различных поверхностях, в лабораторных помещениях применяют различ-ные способы дезинфекции. Слово «дезинфекция» означает обеззаражива-ние, то есть уничтожение возбудителей инфекционных болезней на объек-тах внешней среды.
Пол, стены и мебель в микробиологической лаборатории протирают растворами различных дезинфицирующих веществ, в качестве которых чаще всего используют 2 - 3%-ный раствор соды (бикарбоната натрия), 3 - 5%-ный раствор фенола (карболовой кислоты) или лизола (препарат фенола с добавлением зеленого мыла), 0,5 - 3%-ный водный раствор хло-рамина и некоторые другие дезинфектанты.
Воздух в лаборатории наиболее просто дезинфицировать проветри-ванием. Продолжительная вентиляция помещения через форточку (не ме-нее 30-60 мин) приводит к резкому снижению количества микроорганиз-мов в воздухе, особенно при значительной разнице в температуре между наружным воздухом и воздухом помещения. Более эффективный и наибо-лее часто применяемый способ дезинфекции воздуха - облучение ультра-фиолетовыми лучами с длиной волны от 200 до 400 нм. Ультрафиолетовые лучи обладают слабой проникающей способностью, поэтому в зависимо-сти от степени загрязненности воздуха для его стерилизации требуется об-лучение от 30 мин до нескольких часов. Необходимо иметь в виду, что ультрафиолетовые лучи могут вызвать тяжелые поражения глаз. По-этому при работе с бактерицидными лампами нужно строго следить за тем, чтобы ни прямые, ни отраженные ультрафиолетовые лучи не попадали в глаза. В небольших помещениях при включенной бактерицидной лам-пе находиться нельзя.
Рабочее место, где непосредственно проводится работа с культура-ми микроорганизмов, требует особенно тщательной обработки. Рабочий стол следует дезинфицировать не только до начала работы, но и после ее окончания. Для протирания поверхности стола можно использовать рас-творы лизола и хлорамина, а также 70%-ные (по объему) растворы изопро-пилового или этилового спиртов. В лаборатории не разрешается курить, хранить и употреблять еду, напитки, жевательную резинку. Работать следует в халатах.
Правила работы с культурами микроорганизмов
лаборатории микроорганизмы выращивают в питательных средах, которые разливают в пробирки, колбы, матрацы и чашки Петри. Внесение микроорганизмов в стерильную среду называется посевом, или инокуля-цией. Перед посевом следует тщательно надписать на пробирке (колбе или чашке Петри) название микроорганизма и дату посева. Надпись делают маркером на стекле или на наклеенной этикетке. Клетки микроорганизмов для посева или приготовления препаратов берут бактериологической пет-лей, если микроорганизмы выращены на плотной среде. В том случае, ко-гда пересевают культуры микроорганизмов, выросшие в жидкой питатель-ной среде, пользуются стерильной пипеткой. Использованную пипетку следует немедленно перенести в дезинфицирующий раствор, например 3 - 5%-ный водный раствор фенола или 2%-ный раствор хлорамина, не ка-саясь ею окружающих предметов.
Все манипуляции при посеве следует проводить около пламени го-релки (но не в пламени). Нельзя делать резкие движения и ходить около лица, работающего с чистой культурой, так как движение воздуха увели-чивает вероятность случайного ее загрязнения.
Методы стерилизации питательных сред и посуды
Стерилизация является одним из важнейших и необходимых прие-мов в микробиологической практике. Слово «стерилизация» в переводе с латинского означает обеспложивание. В практической работе под стерили-зацией понимают методы, применяемые для уничтожения всех форм жиз-ни как на поверхности, так и внутри стерилизуемых объектов. Различают термическую и холодную стерилизацию. Способы термической стерили-зации: прокаливание в пламени и обжигание, сухожаровая стерилизация (горячим воздухом), стерилизация насыщенным паром под давлением (ав-токлавирование), дробная стерилизация (тиндализация), кипячение. Мето-ды холодной стерилизации: стерилизация фильтрованием, газообразными средствами, ультрафиолетовыми лучами и другими видами излучений.
Возможность и целесообразность применения того или иного спосо-ба определяется в первую очередь физико-химическими свойствами мате-риала, подлежащего стерилизации, а иногда и целью исследования.
Достарыңызбен бөлісу: |
