Методические указания по выполнению лабораторных работ по дисциплине

жүктеу 174,14 Kb. бет 9/31 Дата 07.09.2023 өлшемі 174,14 Kb. #43284 түрі Методические указания

Навигация по данной странице:

• ЛИТЕРАТУРА
• ЗАДАНИЕ №1. Приготовить препарат «Раздавленная капля».
• ЗАДАНИЕ №2. Приготовить окрашенный препарат методом простой окраски по Грамму.

ПРАВИЛА ТБ НА РАБОЧЕМ МЕСТЕ: Соблюдать правила работы с электроприборами. КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ: Какова техника приготовление неокрашенного препарата? Перечислите достоинства и недостатки неокрашенного препарата? Какова техника приготовления простого неокрашенного препарата? Какова цель фиксации? Перечислите достоинства и недостатки простого окрашенного препарата? Какова техника приготовления препарата, окрашенного по Грамму? ЛИТЕРАТУРА: 1. Мармузова Л.В. «Микробиология пищевых производств». 2. Сидоров М.А., Нецепляев С.В. «Лабораторный практикум по микробиологии». ХОД РАБОТЫ ЗАДАНИЕ №1. Приготовить препарат «Раздавленная капля». На чистое предметное стекло стерильной бактериологической петлей наносят каплю воды, туда же вносят небольшое количество культуры исследуемого микроба и тщательно перемешивают. Затем препарат накрывают покровным стеклом (капля при этом раздавливается) – препарат “раздавленная капля”. Достоинство препарата – получается тонкий слой жидкости, где можно увидеть живые организмы. Недостаток – быстро высыхает, движение прекращается, части попадает воздух, что нарушает микроскопическую картину. ЗАДАНИЕ №2. Приготовить окрашенный препарат методом простой окраски по Грамму. Приготовление окрашенного препарата состоит из следующих стадий: Приготовление мазка - на предметном стекле бактериологической петлей делают мазок исследуемой культуры, распределяя последнюю по стеклу на площади 2-3 см2 (при необходимости добавить на стекло 1-2 капли дистиллированной воды). Высушивание мазка – проводят на воздухе или в термостате. Фиксация – препарат (мазком вверх) несколько раз медленно проводят через пламя горелки до тех пор, пока при прикосновении пальца к стеклу ощутится легкий ожег. Действие пламени не должно быть более 2с. Цель фиксации - Закрепить микробы на стекле. Обезвредить культуру. Убить микробы лучше воспринимают окраску. Окраска препарата - На охлажденный, зафиксированный препарат наносится пипеткой краситель так, чтобы залить весь препарат. Выдерживают 1-2 минуты. В качестве красителя используют метиленовую синь, генцианвиолет, бриллиантовый зеленый, фуксин основной и т.д. Затем краску смывают струей воды. Высушивание окрашенного препарата - Прикладывают к переднему стеклу с обеих сторон фильтровальную бумагу и дополнительно проводят (досушивают) над пламенем спиртовки. Достоинство препарата – хорошая видимость микроорганизмов. Недостаток – отсутствие движения, характерного для многих микроорганизмов. Техника микроскопирования: Микроскопирование неокрашенных препаратов (« Раздавленная капля») микроскопируют с объективом х8 и х40, опуская конденсатор на 1-0,5 см до препарата, добываются наилучшей видимости неокрашенных клеток. Микроскопирование окрашенных препаратов производят при наилучшем освещении поля зрения микроскопа (конденсатор поднят вверх до предела) с иммерсионным объективом 90. При работе с иммерсионным объективом 90 на препарат наносят каплю иммерсионного масла, а затем с помощью макрометрического винта осторожно опускают тубус с центрированным объективом 90 так, чтобы его фронтальная линза погрузилась в каплю масла, а фокус был ниже препарата (мазка). Затем, глядя в окуляр, тем же винтом очень медленно поднимают тубус (на сотые доли миллиметра), пока не увидят изображение микробов. Точную установку препарата в фокус объектива производят с помощью микрометрического винта. По окончанию работы удаляют салфеткой из мягкой ткани иммерсионное масло с фронтальной линзы объектива 90, для более полного удаления масла фронтальную линзу протирают салфеткой, смоченной смесью спирта, затем протирают объектив досуха. Микроскоп помещают на хранение. По результатам микроскопирования заполнить таблицу. № п/п Система микроскопирования Увеличение микроскопа Микроскопируемая культура Рисунок клеток под микроскопом жүктеу 174,14 Kb. Достарыңызбен бөлісу:

©g.engime.org 2024
әкімшілігінің қараңыз