ДНК-полимеразы δ и ε открыты позже ДНК-полимераз α, β и γ. Связано это с тем, что активность обеих ДНК-полимераз зависит от вспомогательных белков: PCNA, RFC и RPA, которые входят в состав холоферментов этих ДНК-полимераз.
ДНК-полимераза δ преимущественно катализирует синтез ведущей цепи ДНК. Она представляет собой гетеродимер, состоящий из каталитической субъединицы с мол. массой 125–130 kD и субъединицы 48–55 kD, необходимой для связи с фактором процессивности PCNA. Обе ферментативные активности – ДНК-полимеразная и 3'-5'-экзонуклеазная – связаны с высокомолекулярным полипептидом. В отсутствие PCNA ДНК-полимераза δ имеет низкую процессивность на длинных однонитевых матрицах, однако в присутствии PCNA процессивность возрастает в 10–100 раз. 3'-5'-экзонуклеазная активность ДНК-полимеразы δ регулируется факторами, входящими в состав холофермента.
ДНК-полимераза ε состоит из нескольких субъединиц. Ферментативные активности – ДНК-полимеразная и 3'-5'-экзонуклеазная – связаны с высокомолекулярным полипептидом, N-концевой домен которого обеспечивает обе активности, а С-концевой необходим для контроля вступления клетки в S-фазу клеточного цикла. ДНК-полимеразы δ и ε, как и ДНК-полимераза α, необходимы для репликации хромосомной ДНК. Обе этих ДНК-полимеразы обладают 3'-5'-экзонуклеазной активностью, выполняющей корректорскую функцию в ходе синтеза ДНК. ДНК-полимеразы δ и ε участвуют и в застраивании брешей в ходе репарации ДНК.
ДНК-полимераза способна эффективно использовать в качестве матрицы ДНК, содержащую циклобутановые комплексы. Фермент осуществлял дистрибутивный синтез ДНК как в присутствии PCNA, так и в его отсутствие и обладал высокой 3'-5' экзонуклеазной активностью. Функция ДНК-полимеразы неизвестна, возможно участие этого фермента в репарации ДНК.
ДНК-полимераза участвует в SOS-ответе дрожжей на генотоксические воздействия, и в присутствии всех четырех dNTP она встраивает в цепь ДНК напротив тиминовых димеров только правильные нуклеотиды.
Терминальная дезоксинуклеотидилтрансфераза (TDT) – единственный нематричный ДНК-синтезирующий фермент. Его активность обнаружена в незрелых клетках крови, а также при некоторых типах лейкемий. В отличие от всех известных на сегодняшний день ДНК-полимераз, TDT катализирует синтез одноцепочечных полинуклеотидных цепей в отсутствие матрицы. Фермент осуществляет последовательное присоединение дезоксирибонуклеозидмонофосфатов из пула дезоксирибонуклеозидтрифосфатов к 3'-OH-группам молекул ДНК в присутствии ионов Mg2+:
Достарыңызбен бөлісу: |