Резюме описание и значение заболевания

жүктеу 51,05 Kb.

бет	4/20
Дата	16.01.2022
өлшемі	51,05 Kb.
	#32589

1 2 3 4 5 6 7 8 9 ... 20

2.04.10 МЭБ лейкоз на рус.яз

Метод
Цель
Население свобода от инфекции	Отдельные животные свобода от инфекции дл начала движения	Способствовать искоренения политики	Подтверждение клинического случая	Распространенность инфекции наблюдается	Иммунный статус в отдельные животные или популяционный пост-вакцинация
Идентификация агента
Вирус изоляция	-	+	-	+	-	n/a
ПЦР	+	++	+	++	+	n/a
Выявление иммунного ответа
РИД	+++	+++	+++	+++	+++	n/a
ТИФВ	+++	+++	+++	+++	+++	n/a

Ключ: +++ = рекомендуемый метод, проверенный для указанной цели; ++ = подходящий метод, но может нуждаться в дальнейшей проверке;

+ = может использоваться в некоторых ситуациях, но стоимость, надежность или другие факторы сильно ограничивают его применение;

– = не подходит для этой цели; n / a = цель неприменима.

ПЦР = полимеразная цепная реакция; РИД = иммунодиффузия агарового геля; ИФА = иммуноферментный анализ

______________________________________________________

Рекомендуется использовать комбинацию методов идентификации агентов, применяемых на одном и том же клиническом образце.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ АГЕНТА

BLV является экзогенным ретровирусом и относится к роду Deltaretrovirus, входящему в подсемейство Orthoretrovirinae и семейство Retroviridae. Он структурно и функционально связан с т-лимфотропными вирусами приматов 1, 2 и 3 (STLV-1, -2, -3) и человеческими Т-лимфотропными вирусами[es] 1 и 2 (HTLV-1 и -2). Основными клетками-мишенями BLV являются В-лимфоциты (Beyer et al., 2002; Gillet et al., 2007). Вирусная частица состоит из двух положительных смыслов один- скрученная РНК, кодирующая нуклеопротеин Р12, капсидный (основной) белок Р24, трансмембранный гликопротеин gp30, огибающий гликопротеин gp51 и несколько ферментов, включая обратную транскриптазу. Провирусная ДНК, которая генерируется после обратной транскрипции вирусного генома, случайным образом интегрируется в ДНК клетки-хозяина, где она сохраняется без постоянного производства вирусного потомства. При культивировании инфицированных клеток in vitro, как правило, путем совместного культивирования PBMC с индикаторными клетками, инфекционный вирус вырабатывается наиболее легко путем стимуляции с помощью митогены.

Изоляция вируса

PBMC из 1,5 мл периферической крови в этилендиаминтетрауксусной кислоте (ЭДТА) выделяют на градиенте плотности фиколл/метризоат натрия, культивируют с клетками 2 × 10⁶ фетальных бычьих легких (ФБЛ) и затем выращивают в течение 3-4 дней в 40 мл минимальной эссенциальной среды (МЕМ), содержащей 20% фетальной телячьей сыворотки.

Вирус вызывает развитие синцитии в клеточном монослое клеток FBL. Краткосрочные культуры могут быть получены культивированием PBMC в отсутствие клеток FBL в 24-луночных пластинах в течение 3 дней (Miller et al., 1985). Антигены p24 и gp51 впоследствии могут быть обнаружены в супернатанте культур с помощью радиоиммуноанализа (RIA), иммуноферментного анализа (ELISA), иммуноблота или иммунодиффузии агарового геля (РИД), и присутствие частиц BLV или BLV-провируса может быть продемонстрировано с помощью электронной микроскопии и ПЦР, соответственно.

жүктеу 51,05 Kb.

Достарыңызбен бөлісу:

1 2 3 4 5 6 7 8 9 ... 20