Практикум по промышленной микробиологии Владимир 2015



жүктеу 0,55 Mb.
бет14/42
Дата05.12.2022
өлшемі0,55 Mb.
#40475
түріПрактикум
1   ...   10   11   12   13   14   15   16   17   ...   42
Book

Окраска капсулы. Эти структуры часто имеют консистенцию геля и плохо видны при микроскопировании живых клеток. Химический состав капсул у разных бактерий неодинаков, поэтому их нельзя выявить каким-либо одним методом окраски. Кроме того, капсулы при окраске легко де-формируются, а вещество капсулы слабо связывает краситель, который легко отмывается в процессе обработки препарата. Чаще всего для выяв-ления капсул применяют способ «негативной» окраски (негативного кон-трастирования) с помощью жидкой туши. Для этого небольшое количество

клеток с плотной среды помещают в каплю разбавленного фуксина, сме-шивают с каплей туши, закрывают покровным стеклом и просматривают с объективом 40 х. На общем темном фоне препарата хорошо видны бес-цветные капсулы, окружающие клетки микроорганизмов, окрашенные в розовый цвет.




Окраска капсул по методу Гинса. На конец предметного стекла микро-биологической петлей наносят каплю черной туши, вносят в нее клетки, хо-рошо перемешивают и ребром покровного стекла делают мазок по всей по-верхности стекла. Мазок высушивают на воздухе и фиксируют 5 - 1 0 мин смесью Никифорова или 3 мин абсолютным метанолом. Далее мазок ок-рашивают карболовым фуксином Циля, разбавленным водой в соотноше-нии 1:3. Время окрашивания - 2 - 3 мин. Препарат промывают водой, вы-сушивают на воздухе и микроскопируют с иммерсионной системой. На темно-сером фоне препарата контрастно выделяются розово-малиновые клетки бактерий, окруженные бесцветными капсулами.


Окраска по Граму. Эта окраска является важным диагностическим признаком, она коррелирует со многими другими свойствами бактерий. По способности окрашиваться красителями триметилфенолового ряда все бактерии делятся на две группы: грамположительные и грамотрицатель-ные. Грамположительные бактерии удерживают комплекс генцианового фиолетового с йодом при обработке препарата спиртом и поэтому окраши-ваются в фиолетовый цвет. Грамотрицательные бактерии не обладают та-кой способностью и обесцвечиваются спиртом. При последующей обра-ботке фуксином или сафранином они приобретают розовую окраску.

Окраска по Граму заключается в следующем. На одном обезжирен-ном стекле делают мазки разных микроорганизмов: в центре - мазок кле-ток исследуемой культуры, слева и справа - контрольных культур. Клетки одной контрольной культуры должны быть грамположительными (напри-мер Micrococcus luteus или Bacillus cereus), другой - грамотрицательными (например Escherichia coli). Мазки следует готовить тонкими, чтобы клет-ки равномерно распределялись по поверхности стекла и не образовывали скоплений. Препарат высушивают на воздухе, фиксируют над пламенем горелки и окрашивают в течение 1 - 2 мин карболовым генциановым или кристаллическим фиолетовым. Затем краситель сливают и, не промывая мазок водой, обрабатывают его 1 - 2 мин раствором Люголя до почерне-ния. Сливают раствор Люголя, препарат обесцвечивают 0,1 - 1,0 мин 96%-ным этиловым спиртом, быстро промывают водой и дополнительно окра-шивают 1 - 2 мин водным фуксином. Краситель сливают, препарат промы-


вают водой, высушивают и микроскопируют с иммерсионной системой. При правильном окрашивании грамположительные бактерии имеют сине-фиолетовый цвет, грамотрицательные - розово-красный.




Экспресс-метод определения грам-типа микроорганизмов. Метод основан на разрушении клеток грамотрицательных бактерий в щелочной среде и определении свободной ДНК. Для этого на предметное стекло на-носят каплю 3%-ного раствора КОН и 1 петлю 24-часовой исследуемой агаровой культуры, тщательно перемешивают. При тестировании грамот-рицательных культур через 5 - 7 с при движении петли вверх образуется слизистый след длиной 1 - 2 см; если слизь не образуется, то тестируемая культура грамположительная.
Лабораторная работа № 9

жүктеу 0,55 Mb.

Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   10   11   12   13   14   15   16   17   ...   42




©g.engime.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет
рсетілетін қызмет
халықаралық қаржы
Астана халықаралық
қызмет регламенті
бекіту туралы
туралы ережені
орталығы туралы
субсидиялау мемлекеттік
кеңес туралы
ніндегі кеңес
орталығын басқару
қаржы орталығын
қаржы орталығы
құрамын бекіту
неркәсіптік кешен
міндетті құпия
болуына ерікті
тексерілу мемлекеттік
медициналық тексерілу
құпия медициналық
ерікті анонимді
Бастауыш тәлім
қатысуға жолдамалар
қызметшілері арасындағы
академиялық демалыс
алушыларға академиялық
білім алушыларға
ұйымдарында білім
туралы хабарландыру
конкурс туралы
мемлекеттік қызметшілері
мемлекеттік әкімшілік
органдардың мемлекеттік
мемлекеттік органдардың
барлық мемлекеттік
арналған барлық
орналасуға арналған
лауазымына орналасуға
әкімшілік лауазымына
инфекцияның болуына
жәрдемдесудің белсенді
шараларына қатысуға
саласындағы дайындаушы
ленген қосылған
шегінде бюджетке
салығы шегінде
есептелген қосылған
ұйымдарға есептелген
дайындаушы ұйымдарға
кешен саласындағы
сомасын субсидиялау