Рис. 4.12. Типичный спектр для гамма-резонансной спектроскопии
Весьма чувствительным (нанограммы вещества и менее на 1 мл пробы) и специфичным методом исследования некоторых биологических веществ (в частности, антигенов и антител) в жидких пробах является радиоиммунологический анализ , технологическая процедура которого подробно рассмотрена ранее. Принцип РИА состоит в применении радиоактивного изотопа, который действует как маркер исследуемого вещества. Оценка результата производится количественно с помощью различных счетчиков радиоактивности.
Принципиальным для радиоиммунологического исследования является введение в анализируемую смесь специфического реагента в определенной концентрации. В зависимости от этого реагента различают несколько модификаций метода. Так при введении специфических связывающих белков проводится конкурентный белковосвязный анализ ;при введении специфических энзимов—радиоэнзимный анализ : при введении специфических микроорганизмов—радиомикробиологический анализ и т.п.
МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ
Метод масс-спектрометрии (МСМ) основан на ионизации атомов и молекул изучаемого вещества и последующем разделении образовавшихся ионов в магнитном и электрическом полях. Определение содержания в смесях различных по химическому и изотопному составу соединений и их молекулярный или атомный вес производится на основе регистрации ионных пучков (пакетов), полученных при ионизации и последующем разделении вещества.
Для ионизации пробу облучают фотонами, ионами, воздействуют на нее электрическим полем и др. В ходе дальнейшего эксперимента происходит пространственное разделение пучков ионов с разными отношениями массового числа иона m к его заряду q (масс-спектр) (под массовым числом понимается сумма протонов и нейтронов ядра). В основе разделения лежит свойство ионов менять направление или скорость своего движения в электрическом и (или) магнитном полях в зависимости от масс-спектра частицы.
При проведении исследования последовательно выполняют следующие операции:
— перевод образцов твердых или жидких сред в газообразное состояние;
— ионизация молекул анализируемого вещества и форми-рование ионного пучка;
— разделение ионного пучка по массам в магнитном и (или) электрическом полях;
— улавливание ионов;
— раздельное измерение и регистрация ионных токов каждой составляющей ионного пучка.
Принцип разделения ионов можно пояснить следующим образом (рис. 9.2). Пусть ионы вещества, вылетая из узкой щели, двигаются в однородном поперечном магнитном поле с напряженностью Н. Щель, расположенная в точке S, выделяет ионы в пределах угла 2α, и ионы будут двигаться по окружности с радиусом Центральный луч пересечет ось в точке х0 = 2r, а лучи, прошедшие у края щели, пересекут ось в , при этом ширина изображения.Если угол мал, то
,
где ν_ начальная скорость вылета иона; определяется параметрами масс-спектрометра.
Достарыңызбен бөлісу: |