2.2.5 Тестовые сыворотки
Подходят сыворотки от любых видов животных.
2.2.6. Процедура теста
Агар расплавляют нагреванием на водяной бане и разливают в чашки Петри (15 мл на чашку Петри диаметром 8,5 см). Налитым пластинам дают остыть при температуре 4°С примерно за 1 час до того, как в агаре будут вырезаны отверстия. Используется перфоратор, который разрезает шестиугольную систему из шести скважин вокруг центральной скважины. Можно использовать различные размеры скважин; одна удовлетворительная модель была получена с использованием скважин диаметром 6,5 мм с расстоянием между скважинами 3 мм. Для достижения наилучших результатов агаровые пластины используются в тот же день, когда они разливаются и режутся.
Антиген помещают в центральные лунки шестиугольных узоров. Тестовые сыворотки помещают попеременно с положительной контрольной сывороткой во внешние лунки. На каждой пластинке должен быть один контрольный паттерн с положительной контрольной сывороткой, слабой положительной контрольной сывороткой и отрицательной контрольной сывороткой вместо тестовых сывороток.
3) Испытательные пластины выдерживают при комнатной температуре (20 °-27°С) в закрытой влажной камере и читайте в течение 24, 48 и 72 часов.
4) Интерпретация результатов: тестируемая сыворотка является положительной, если она образует специфическую линию преципитации с антигеном и образует линию идентичности с контрольной сывороткой. Тестируемая сыворотка отрицательна, если она не образует специфической линии с антигеном и если она не изгибает линию контрольной сыворотки. Могут возникать неспецифические линии; они не сливаются с линиями, образованными положительным контролем, и не отклоняются от них. Тестируемая сыворотка является слабой положительной, если она изгибает линию контрольной сыворотки к антигену хорошо, не образуя видимой линии осаждения. реакция неубедительна, если ее нельзя считать ни отрицательной, ни положительной. Тест считается недействительным, если элементы управления не дают ожидаемых результатов. Сыворотки, дающие неубедительные или слабые положительные результаты, можно концентрировать и повторно тестировать.
С. ТРЕБОВАНИЯ К ВАКЦИНАМ
Несмотря на успехи в исследованиях экспериментальных вакцин, до сих пор не существует коммерчески доступной вакцины для борьбы с EBL.
Достарыңызбен бөлісу: |