Окраска бактерий по Граму

териологическая петля, спиртовка, чистые предметные стекла, столик для окрашивания препаратов, промывалка с водой, красящая бумага с кристал-лвиолетом или 1%-ный раствор кристаллвиолета или генцианвиолета, рас-твор Люголя, 96%-ный этанол, 0,1%-ный раствор фуксина или раствор Пфейфера, чистые культуры контрольных (с известным типом окраски) грамположительных и грамотрицательных бактерий и исследуемые мик-роорганизмы, иммерсионное масло для микроскопии.

1. 
   Приготовьте на одном предметном стекле три фиксированных мазка бактерий: а) контрольной грамотрицательной культуры с одного конца стекла; б) контрольной грамположительной культуры с другого кон ца стекла и в) исследуемой культуры в центре стекла. Мазки должны быть тонкими, клетки бактерий должны быть равномерно распределены на стекле, иначе окрашивание будет неправильным.
   

2. 
   Мазки окрашивают кристаллвиолетом в течение 2 мин.
   

3. 
   Кристаллвиолет смывают раствором Люголя и заливают мазки этим же раствором на 2 мин.
   

4. 
   Раствор Люголя смывают и окрашенные мазки обесцвечивают 96%-ным этиловым спиртом, погружая стекло с мазками в стакан со спир том на 30 с или промывая стекло спиртом из пипетки в течение 30 с.
   

4. 
   Тщательно промывают стекло с мазками водой (предпочтительно дистиллированной) и наносят на стекло 0,1%-ный раствор фуксина или раствор Пфейфера.
   

4. 
   Через 2 мин краску сливают, стекло тщательно промывают водой, высушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют, пользуясь им мерсионным объективом. Грамположительные бактерии окрашиваются в сине-фиолетовый цвет, а грамотрицательные - в красный или розовый цвет дополнительного красителя (фуксина).
   

4. 
   Зарисуйте каждый препарат в альбом.