10.3. Этапы транскрипции
Процесс транскрипции подразделяют на 4 основные стадии: 1) связывание молекул РНК-полимеразы с ДНК и распознавание промотора; 2) инициация; 3) элонгация; 4) терминация. Цикл транскрипции начинается с присоединения РНК-полимеразы к определенному участку ДНК, где происходит формирование инициационных комплексов. Инициация транскрипции – это начало синтеза цепи РНК, во время инициации образуется первая связь между нуклеотидами в молекуле вновь синтезируемой РНК. Затем идет наращивание цепи РНК, ее последовательное удлинение – элонгация. Синтез РНК завершается в строго определенных участках матрицы – терминаторах. Здесь происходит терминация транскрипции, когда от ДНК отделяются и готовая РНК, и кор-фермент РНК-полимеразы, который, объединившись со свободной σ-субъединицей, может вступить в следующий цикл транскрипции. Новообразованная РНК упаковывается в рибонуклеопротеиновые частицы. Основные этапы транскрипции схематически представлены на рис. 10.2.
Рис. 10.2. Основные этапы транскрипции.
Механизм поиска промоторов на ДНК молекулами РНК-полимеразы в настоящее время до конца не выяснен. Считается, что молекулы полимеразы непрочно связываются с ДНК в случайных местах и перемещаются вдоль цепи ДНК, пока не обнаруживают последовательности нуклеотидов промоторов. При этом молекулы РНК-полимеразы могут периодически отделяться от ДНК и связываться с ней на новом месте. В связывании с ДНК участвует -субъединица РНК-полимеразы.
10.3.1. Инициация
После связывания с ДНК молекулы РНК-полимеразы осуществляют поиск промоторов, на которых происходит формирование инициационных комплексов. Инициация осуществляется с участием σ-субъединицы. Промотор – это предшествующая гену последовательность нуклеотидов, которую узнает фермент. Основной элемент промотора – место связывания РНК-полимеразы, которое она занимает перед началом синтеза РНК. В состав промоторов могут входить также участки связывания белков-регуляторов. Разные промоторы несколько отличаются по нуклеотидной последовательности, что и определяет эффективность транскрипции разных генов.
σ-субъединица РНК-полимеразы садится на промотор в ДНК и разными участками белковой молекулы взаимодействует с участками промотора. Распознает его σ-субъединица через большую бороздку ДНК. После того как σ-субъединица в составе кор-фермента связалась с промотором, нити ДНК на этом участке расплетаются. Промотор содержит пары А-Т, поэтому плавится он достаточно легко. Затем начинается синтез РНК, растущая цепь РНК выталкивает σ-субъединицу, и происходят другие изменения, которые вызывают диссоциацию σ-субъединицы от кор-фермента.
Инициация заключается в образовании первых нескольких звеньев цепи РНК из нуклеозидтрифосфатов, служащих субстратами для РНК-полимеразы. Первый нуклеотид входит в состав цепи, сохраняя свою трифосфатную группу, а последующие присоединяются к 3'-OH-группе предыдущего с освобождением пирофосфата. На стадии инициации РНК-продукт связан с матрицей и РНК-полимеразой непрочно и с высокой вероятностью может освобождаться из комплекса. В этом случае РНК-полимераза, не покидая промотора, снова инициирует РНК. Когда РНК-продукт достигает длины от 3 до 9 нуклеотидов (в зависимости от промотора), транскрибирующий комплекс стабилизируется и уже не распадается до тех пор, пока синтез молекулы РНК не будет доведен до конца. Примерно в этот же момент, который считается концом инициации, от бактериальной РНК-полимеразы отделяется σ-субъединица.
Достарыңызбен бөлісу: |