Жұмыстың орындалу ретi:
1. ЭФ камераға «Simacel N» буферлі ерітіндісінен 250 мл құйып, камераның бір шетін ақырын көтеріп, ерітінді анод пен катод арасында бір бедей таралатындай ету керек. Камераның екі бөлігінде буфер ерітіндісінің деңгейі бірдей болуы керек
2. Шыны ыдысқа «Simacel N» буфер ерітіндісінен 50–100 мл құямыз. Таза ацетил целлюлозды мембрана (АЦМ) қағазын буфер ерітіндісіне бір шетінен бастап 5–10 мин. жайлап батыру керек, себебі мембрана тесіктерінде ауа қалып кетуі мүмкін.
3. АЦМ буфер ерітіндісінен алып, екі сүзгіш (фильтр) қағазының арасына қойып, жеңіл басу арқылы артық буфер ерітіндісінен айыру керек.
4. АЦМ-сын арнайы көпірге орнату керек. Ол үшін АЦМ-сының бір жағындағы саңлауын көпірдің арнайы бөлігіндегі орынға, ал екінші жағын қарсы жағындағы орынға кигізу керек.
5. Зерттелінетін затты тамызатын диспокартқа арнайы дозатормен 11 мкл қан сарысуын алып, сәйкес ұяшықтарды толтыру керек.
6. Апликаторды тік ұстап, диспокарттың сәйкес ұяшықтарын жайлап басу керек. Бұл кезде апликатордың тістерінің кеуекті беті зерттелінетін затты өзіне сіңіріп алады. Апликатордың әрбір тісіне диспокарттың белгілі бір ұяшығы сәйкес келеді. Апликатормен алынған бірінші нәтижені сүзгіш қағазғаі ал содан кейін АЦ мембранаға аппликатордың көмегімен қан сарысуын тамызу керек. Ол үшін апликаторды АЦ мембрананың катод жағындағы арнайы көпірдің саңлауына 3-5 секунд ішінде жанасатында етіп орнату керек.
7. АЦ мембранасы орнатылған көпірдің нүкте қойылған жағын міндетті түрде катодқа сәйкестендіріп камераның ішіне орнату керек.
8. ЭФ камераның қақпағын жабу керек.
8.1. «Display» пернесін басып, «жоғары» және «төмен» пернелері арқылы экрандағы кернеуді 200 В-қа қою керек.
8.2. «Display» пернесін басу арқылы экрандағы ток шамасының 5 мА – ден аспау керектігін қадағалау керек.
8.3. «Display» пернесін басып, «жоғары» және «төмен» пернелері арқылы экрандағы уақытты 30 мин.-қа қою керек.
8.4. «Start» пернесін басу керек, сол кезде уақыттың кері санауы басталады.
Ескерту: Камераның желісін түсіне қарай, қызыл түсін – қызылға, қара түсін – қараға қосу керек.
9.Уақыт біткеннен кейін ток көзінен ажыратып, камераның қақпағын тік жоғары қисайтпай ашу керек. АЦ мембранаға тамшылардың тамып кетпеуін қатаң түрде қадағалау қажет.
10. «Red Ponceau S» 150 мл. көлемінде боялған ерітінді құйылатын ыдыс дайындап, АЦ мембранасын 5-10 минут боялған ерітіндіге батырып, оны міндетті түрде бірнеше рет араластырып отыру керек.
11. Боялған мембрананы түссіздендіру және жуу үшін 200-300мл. «Destaining & Trasparency» ерітінді құйылатын ыдыс дайындау керек.
12. АЦ мембранасын салап жуу керек. Егер мембрана қағазы көгілдір болса - 3 минут сары түсті болса - 4 минут ерітіндіде ұстау қажет.
13. АЦ мембрананың бетіндегі ерітіндінің қалдықтарын, ауа көпіршіктерінен тазарту үшін шыны пластинканың бетіне орналастырып, екінші шыны пластинканмен жәйлап қыру керек.
14. АЦ мембрананы кептіргіш шкафта немесе инфрақызыл шамның астында 70-100 0С –та шыны пластинканың бетіне қойып, 3 – 5 минут кептіру керек.
15. Skanion фото-денситометр арқылы 525 нм толқын ұзындығында электрофореграмманы талдау.
16. Денситометрдің оптикалық жүйесі толық тыныштану үшін 5 минут күту керек. Содан кейін экранда «№1-ші бағдарлама – қан сарысуының ақуыздары» деген бас мәзір шығады.
17. Зертеуге арналған бөліктің қақпағын ашып, шыны пластинка бетіндегі электрофореграмманы дұрыс ораластырып, оның қақпағын жауып ,«SCAN» пернесін басу керек. Сол кезде экранда:
18. Ақуыздың жалпы мәнін (PROTEINS) енгіз деген сұрау шығады, оның орнына 7,8 деген санды енгізіп, «ENTER» пернесін басу керек.
19. Егер ұзындықты (LENGTN) өзгерту керек болса қалаған мәнді таңдап алып енгізгеннен кейін «ENTER» пернесін басу керек. Егер керек болмаса сол жердегі берілген шаманы алу үшін «ENTER» пернесін басу керек.
20. Егер идентификациялық ретін (SAMPLE) өзгерту керек болса қалаған мәнді таңдап алып енгізгеннен кейін «ENTER» пернесін басу керек. Егер керек болмаса сол жердегі берілген шаманы алу үшін «ENTER» пернесін басу керек.
21.Зертеу басталғанда экранда «READING...» деген жазу пайда болады. Бірнеше уақыттан кейін қағаз бетінде барлық нәтиже басылып шығады. Егер STOP пернесін басса қондырғы бас мәзірге қайта келеді.
22. Электрофореграмма арқылы иондардың қозғалғыштығын анықтау:
22.1. ЭФ камераны токпен қоректендіретін ток көзінің экрандағы кернеу (U) және уақытты (t) жазып алу керек.
22.2 Электрофореграммадан (2 сурет) АЦ мембрананың ерітіндіге батырылған екі ұштарының арақашықтығы «L», және мембрана бетінде иондардың жылжыған қашықтығы «Х»-ті өлшеу керек.
22.3 Өлшеу нәтижелерін 1-кестеге енгізу керек:
1-кесте
U (В)
|
t (сек)
|
L (м)
|
Х (м)
|
b (м/Вс)
|
|
|
|
|
|
22.4. Иондардың қозғалғыштығын формуласымен есептеу керек.
Әдебиет:
1. Байзак Y.А., Құдабаев Қ.Ж. Медициналык биофизика мен медтехникалар бойынша лабораториялык практикум.-Алматы: Эверо, 2011
2. Көшенов Б. Медициналык биофизикадан зертханалык жумыстар: оку-әдістемелік құрал.-2 бас, өңделіп,толықтырылған.- Алматы: Эверо, 2010
3. Ремизов А.Н. Медицинская и биологическая физика: учеб. для вузов. -7е изд., стереотип.. -М.: Дрофа, 2007.
4. Антонов, В. Ф. Физика и биофизика : учебник. - М.: ГЭОТАР - Медиа, 2010. - 480 с.
5. Антонов В. Ф. Физика и биофизика : курс лекций для студентов мед. вузов: учебное пособие для вузов. -2-е изд., испр. и доп.. -М.: ГЭОТАР-Медиа, 2005. -240 с.
6.Тиманюк В. А. Биофизика : учебник для студентов фармацевтических и мед. вузов. -2-е изд. -К.: ИД "Профессионал", 2004.
7. Бақылау:
Ион қалай қозғалады
Ионның қозғалғыштығы дегеніміз не?
Ионның қозғалғыштығын анықтайтын формула қандай?
Электрфорез фармацияда не үшін қолданылады?
1. Кернеулiгi Е электр өрiсiндегi электролит ионына ... әсер етедi.
а) бiр мезгiлде электролиттiң кедергi күшi Fr және ауырлық күшi P=mg
б) бiр мезгiлде F=qE және ауырлық күшi P=mg
с) тек P=mg күшi ғана
д) тек Fr күшi ғана
e) бiр мезгiлде F=qE және Fr күштерi
2. Электрофорез-физиотерапиялық емдеу мақсатында қолданылатын ... әдiс болып табылады.
a) химия-фармацевтiк
b) физика-химиялық
c) биофизикалық
d) физика-фармацевтiк
e) жалпы терапиялық
3. Электрофоретикалық қондырғыдағы иондардың қозғалысын ... деп қарастыруға болады.
a) бiрқалыпты түзу сызықты
b) үдемелi
c) кемiмелi
d) бiрқалыпсыз
е) айнымалы
4. Электролиттегi иондардың қозғалғыштығы (b) мен жылдамдығының (v) арасындағы байланыс ... өрнегiмен анықталады.
a) v=b*E
b) b=v*E
c) v=b/E
d) v=b+E
e) v=b^2*E
5. Электрофорез медицинада … анықтау үшiн қолданылады.
ионның жылдамдығын
қан сарысуының, ас қазан сөлiнiң ақуыз құрамының бөлiктерiн
қан құрамындағы қант концентрациясын
әртүрлi дәрiлiк ерiтендiдегi иондардың жылдамдығын,қозғалғыштығын
қан сарысуының жарқырауын
6.Электpолиттегi иондаpдың қозғалғыштығын ... аpқылы сипаттайды.
электpолиттегi электp өpiсiнiң кеpнеулiгi 1 В/м болғанда иондаpдың заpяды
электpолиттiң темпеpатуpасы 20 гpадус болғанда иондаpдың массасы
электpолиттiң тығыздығы аpқылы сипаттайды.
электpолиттегi электp өpiсiнiң кеpнеулiгi 1 В/м болғанда иондаpдың жылдамдығы
электpолиттегi электp өpiсiнiң кеpнеулiгi 1 В/м болғ∙анда иондаpдың үдеуi
№ 6 Сабақ.
Тақырыбы: №5 жұмыс: Фотоэлектрлік фотометрiнiң көмегiмен ерiтiндiлердiң концентрациясын анықтау.
2. Мақсаты: Фармацевтiк препараттардың концентрациясын калибровтiк график көмегiмен анықтау тәсілдерін оқыту.
3. Оқыту мақсаты: фотометрдiң құрылысын, онымен жұмыс iстеудi жете меңгерту.
4.Тақырыптың негізгі сұрақтары:
Жарықтың жұтылуы дегеніміз не?
Бугер – Ламберт – Бер заңы қалай өрнектеледі?
КФК – 3 құрылысы қандай бөліктерден тұрады?
Заттардың оптикалық тығыздығы қалай анықталады?
5. Концентрациясы белгiсiз боялған ерiтiндiнiң (Сх) концентрациясын қалай анықтайды?
Достарыңызбен бөлісу: |